猪流行性腹泻病毒的RT-PCR检测及DY株的分离鉴定

作者：任玉鹏; 陈弟诗; 颜其贵; 程渝; 郭玲; 杨绍林; 舒蕾

来源：中国兽医科学, 2013, (07): 672-677.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2013.07.001

• 猪流行性腹泻病毒
• DY株
• RT-PCR
• 分离鉴定 porcine epidemic diarrhea virus
• DY strain
• RT-PCR
• isolation and identification

采集四川省某猪场疑似感染猪流行性腹泻病毒(PEDV)的粪便样品进行病原分离鉴定,并进一步研究了其分子生物学特性。参照NCBI上登录的CV777株M基因全基因序列设计引物,用RT-PCR法初步鉴定样品阴阳性,用Vero细胞对病毒进行连续带毒传代,将分离得到的阳性毒株命名为DY株,并克隆测定其M基因序列,分析结果表明,该株PEDV与NCBI上10个毒株的推导氨基酸序列同源性均高于95%,遗传进化树分析结果表明该毒株与GDYE9遗传距离最近;观察DY株引起的细胞病变,同时应用电镜技术对病毒形态进行观察;通过TCID50测定、中和试验以及核酸类型的鉴定,综合判定病毒分离成功。用分离的细胞毒进行乳猪回归...

• 单位
  西南民族大学; 四川农业大学