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摘要
为建立一种可用于奶牛蹄部感染性疾病研究的皮肤外植体模型，本研究利用气液交界面皮肤组织培养模式离体培养健康奶牛后蹄趾间皮肤，分别于培养0、12、24、36、48和72 h收集皮肤组织并采用HE染色法、原位末端标记(TUNEL)法及免疫组织化学方法对外植体的病理组织变化、组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白Caspase-3表达进行检测。结果表明：1)与0 h对照组模型相比，培养12、24和36 h的皮肤组织表皮结构完整，真皮层发生不同程度变性；36 h皮肤组织上皮细胞出现变性迹象；48 h皮肤组织上皮细胞发生不同程度变性、坏死，并伴有核固缩；72 h皮肤组织表皮脱落、缺失，皮肤附属器官发生不同程度坏死，无法保持正常的组织结构和功能。2)皮肤外植体细胞发生不同程度凋亡，Caspase-3蛋白呈阳性表达，且表皮中凋亡细胞数量及Caspase-3蛋白阳性表达情况高于真皮。与对照组相比，24 h皮肤外植体细胞凋亡情况出现显著差异(P<0.05),36 h皮肤外植体Caspase-3蛋白阳性率出现显著差异(P<0.05)。本研究构建了一种稳定的奶牛趾间皮肤外植体模型，离体培养24 h仍保持正常的组织结构、形态功能及活性，为奶牛蹄部感染性疾病体外研究提供一种新方法。
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单位黑龙江八一农垦大学; 动物科技学院
