TRIM59对人鼻咽癌细胞增殖、凋亡及EMT的影响

作者:罗燕贞; 刘翔; 王文忠*
来源:山西医科大学学报, 2022, 53(08): 981-991.
DOI:10.13753/j.issn.1007-6611.2022.08.011

摘要

目的 探讨三基序蛋白59(tripartite motif containing 59,TRIM59)对人鼻咽癌细胞增殖、凋亡、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及相关分子机制。方法 Western blot检测鼻咽癌细胞系HNE1、CNE-2Z和人正常鼻黏膜上皮细胞系(HNEpC)中TRIM59的蛋白表达情况。实验中HNE1和CNE-2Z分别构建si-NC组(Lip2000+si-NC)、si-TRIM59组(Lip2000+si-TRIM59)和mimic-NC组(Lip2000+mimic-NC)、TRIM59-mimics组(Lip2000+mimic-TRIM59)。CCK-8和集落形成实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测TRIM59对鼻咽癌细胞凋亡的影响;细胞划痕试验和Transwell检测细胞上皮-间质转化(EMT)能力;同时通过Western blot分析下调或上调TRIM59后鼻咽癌细胞中凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)的表达情况;通过Western blot分析TRIM59对鼻咽癌细胞中EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的影响。结果 与人正常鼻黏膜上皮细胞系(HNEpC)相比,TRIM59在HNE1和CNE-2Z中表达上调(P<0.05)。与si-NC组相比,si-TRIM59组细胞中TRIM59的蛋白表达量明显下降(P<0.05);与mimic-NC组相比,TRIM59-mimics组细胞中TRIM59的蛋白表达量明显上升(P<0.05)。与si-NC组相比,si-TRIM59组细胞的增殖受到抑制(P<0.05);与mimic-NC组相比,TRIM59-mimics组细胞增殖明显升高(P<0.05)。与si-NC组相比,si-TRIM59组细胞的凋亡数量明显上升,Bax上升,Bcl-2下降(均P<0.05);与mimic-NC组相比,TRIM59-mimics组细胞的凋亡数量明显下降,Bax下降,Bcl-2上升(均P<0.05)。与si-NC组相比,si-TRIM59组细胞的EMT能力明显下降,E-cadherin表达上升,N-cadherin和Vimentin表达下降(均P<0.05);与mimic-NC组相比,TRIM59-mimics组细胞的EMT能力明显上升,E-cadherin表达下降,N-cadherin和Vimentin表达上升(均P<0.05)。结论 下调TRIM59抑制鼻咽癌细胞的增殖及EMT过程,促进凋亡,上调TRIM59可促进鼻咽癌细胞的增殖及EMT过程,抑制凋亡。

全文