三氧化二砷对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中低氧诱导因子与其相关因子的影响

作者：李宏颖; 魏雪敏; 韩玉艳; 梅轶芳; 张志毅

来源：哈尔滨医科大学学报, 2016, 50(05): 383-387.

• 三氧化二砷
• 类风湿关节炎
• 滑膜成纤维细胞
• HIF-1α
• VEGF
• MMP-3

目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(rheumatoid synovial fibroblasts,RA FLS)的HIF-1α、VEGF和MMP-3的作用并探讨ATO对RA FLS通过低氧诱导因子与其相关因子的血管新生作用的相关机制。方法将RA FLS培养至37代细胞进行实验,按以下分组加入相应药物共培养24 h:1组:空白对照组,2组:ATO 0.5μmol/L组,3组:ATO 1μmol/L组,4组:ATO 2μmol/L组,5组:ATO 4μmol/L组,6组:ATO 8μmol/L组。提取上清液用ELISA法检测各组VEGF和MMP-3的蛋白含量,提取细胞总RNA用实时定量PCR法检测HIF-1α、VEGF和MMP-3的表达,提取细胞蛋白用Western blot法检测细胞中HIF-1α的蛋白含量。结果 ELISA结果显示:各ATO药物实验组的VEGF和MMP-3蛋白含量与空白对照组相比明显降低(P<0.05),随着ATO浓度的升高,上清中VEGF和MMP-3的含量也有降低的趋势且部分浓度之间有明显降低并存在统计学差异(P<0.05)。Real time-PCR结果显示:各ATO药物实验组的VEGF、MMP-3和HIF-1αmRNA的表达量与空白对照组相比明显降低(P<0.05),随着ATO浓度的升高,VEGF、MMP-3和HIF-1α的mRNA表达量有降低的趋势且部分浓度之间有明显降低并存在统计学差异(P<0.05)。Western blot结果显示:与空白对照组相比,各药物实验组的HIF-1α的蛋白量明显减少。结论 ATO可以通过抑制RA FLS VEGF、HIF-1α及MMP-3的mRNA的表达、细胞VEGF和MMP-3水平,降低细胞中HIF-1α的蛋白含量,来抑制RA FLS血管新生的作用。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第一医院