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摘要
目的尝试在酵母中表达人乙型肝炎聚合酶蛋白(HBV-Pol),并用镍基颗粒队蛋白粗提物进行部分纯化。方法将全长HBV-Pol基因用PCR方法扩增并连接到在酿酒酵母高效表达的质粒中。转化株于30℃培养3 d后进行诱导表达16 h,4℃下收集蛋白粗提物并用镍基颗粒进行提纯。用免疫印迹技术检测表达结果。结果重组的HBV-Pol存在于该型酵母的蛋白粗提物中,该蛋白产物可被Nickel-particle提取。结论本研究为实现HBV-Pol在S.c.中的高水平表达提供了可靠依据,也便于HBV-Pol的生化特性研究以及蛋白纯化和抗体制备的进一步开展。
