科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
【目的】探究褐飞虱Nilaparvata lugens雄虫特异基因NlEF7的组织表达特性，为褐飞虱多组织的解剖分离以及基因表达的组织原位杂交提供参考。【方法】选择不同发育时期的褐飞虱雌成虫和雄成虫，在显微镜下解剖获取唾液腺、肠、雌虫生殖器和雄虫生殖器等组织并提取RNA利用定量PCR进行NlEF7表达分析。利用地高辛标记NlEF7探针，通过多聚甲醛固定样本和NBT/NBCT显色，进行了组织RNA原位杂交检测。【结果】获得了唾液腺、肠道、内生殖器的细致解剖显微实图，展示了褐飞虱内生殖器的形态变化，据此可确认雌虫的交配状况。定量PCR和原位杂交分析结果表明，NlEF7基因在雄虫内生殖器和脂肪体中特异性表达，且在睾丸中表达量最高。利用完整的虫体进行固定和原位杂交后解剖观察，几乎没有杂交信号。对虫体进行破坏性处理或分离组织样本再进行固定和杂交有助于提高杂交信号的强度。【结论】NlEF7基因在褐飞虱雄虫内生殖器和脂肪体中特异性表达。
-
单位中国水稻研究所; 水稻生物学国家重点实验室
