Wnt5a对成熟树突状细胞诱导初始性T细胞向记忆性T细胞分化的作用

作者：罗蕾; 李震宇; 罗光恒; 黄山; 黄延彪; 夏旻; 邬卫东^*

来源：武汉大学学报(医学版), 2019, 40(02): 173-180.

DOI：10.14188/j.1671-8852.2017.1056

• 树突状细胞
• 记忆性T细胞
• Wnt基因
• β-catenin/TCF信号通路

目的:利用负载供者抗原的未成熟或成熟树突状细胞(imDCs或mDCs)体外诱导受者初始性T细胞(TNs)的活化、增殖和分化,并研究Wnt5a基因在这一过程中的可能的作用及其机制。方法:构建高表达Wnt5a基因的重组腺病毒,转染imDCs。建立同种异体小鼠皮肤移植模型,分选培养受体小鼠的imDCs,mDCs和TNs。在96孔板中用负载供者抗原的imDCs、转染腺病毒Ad/CMV/Wnt5a的imDCs、转染腺病毒Ad/CMV/LacZ的imDCs,和正常mDCs与记忆性T细胞(TMs)进行混合淋巴细胞反应。流式细胞术检测TNs向TMs分化的情况。ELISA检测共培养上清中IL-2,IL-10,IFN-γ细胞因子的浓度。RT-PCR检测T细胞中Wnt/β-catenin通路相关的基因表达情况。双荧光素酶报告基因检测混合淋巴细胞反应中TNs的β-catenin/TCF信号通路转录活性。结果:RT-PCR和免疫荧光检测发现mDCs中的Wnt5a的表达水平显著高于imDCs(P<0.05)。与负载供者抗原的mDCs相比,imDCs组可显著诱导TNs向TMs的分化,上调IL-2和IFN-γ细胞因子的分泌(P<0.05)。双荧光素酶报告系统检测显示mDCs共培养TNs可显著增强β-catenin/TCF信号通路转录活性(P<0.05)。此外,imDCs通过转染高表达Wnt5a基因的重组腺病毒,也显著提高了其诱导TNs向TMs的分化的能力,同时也显著活化了Wnt/β-catenin信号通路(P<0.05)。结论 :在负载供者抗原的DCs与受者TNs混合淋巴细胞反应过程中,可诱导TMs分化形成,其中DCs的Wnt5a基因介导的TNs内β-catenin/TCF信号通路转录激活可能是其中一条重要的途径。

• 单位
  贵州省人民医院