胎胰蛋白促进人脂肪来源的间充质干细胞向胰岛素及C-肽阳性细胞的分化及细胞鉴定

作者：任莉莉; 陈丽娟; 齐晖; 李富荣

来源：吉林大学学报(医学版), 2012, (01): 19-24.

• 间充质干细胞
• 胰腺
• 细胞分化
• 细胞移植 mesenchymal stem cells
• pancreas
• differentiation
• cell transplantation

目的:利用大鼠胚胎胰腺组织蛋白提取物诱导人脂肪来源的间充质干细胞(hASCs)向胰岛素分泌细胞分化,为临床胰岛移植寻找新的细胞来源。方法:将新生SD大鼠的胚胎胰腺匀浆后提取胎胰蛋白,重建胰腺微环境,诱导hASCs向胰腺方向分化。诱导组为胎胰蛋白培养组,对照组不添加胎胰蛋白,其余培养条件相同,诱导20d后,荧光定量PCR技术检测2组胰腺发育相关基因的表达水平,ELISA法检测细胞悬液胰岛素水平,荧光免疫组织化学检测细胞C-肽蛋白表达。结果:在胎胰蛋白诱导过程中,hASCs重要标志基因Oct3/4及Nanog的表达持续降低,说明hASCs逐渐失去全能干细胞的特性;在诱导的第6天开始检测到PDX-1和CK-19的表达上调,诱导细胞出现了胰腺方向的分化,12d开始检测到胰岛素的阳性表达。所获分化细胞基础相分泌胰岛素量为(287.17±15.67)mIU.L-1,高糖刺激下为(401.09±28.94)mIU.L-1,二者比较差异有统计学意义(P<0.01),且均明显高于对照组的(4.85±1.04)mIU.L-1(P<0.01);免疫荧光检测,诱导组可见C肽阳性细胞,对照组未见C-肽阳性细胞。结论:模拟的微环境可诱导hASCs分化为有功能的胰岛素产生细胞,具有替代胰岛细胞治疗糖尿病的潜在可能性。

• 单位
  深圳市老年医学研究所; 深圳市人民医院