P53 shRNA对肝癌细胞增殖的影响

作者：欧贤红; 廖柳凤; 陆游; 徐恒; 刘华钢

来源：基础医学与临床, 2012, 32(04): 354-358.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2012.04.023

• RNA干扰
• P53
• P21
• 肝癌

目的观察用RNA干扰(RNAi)下调SMMC-7721人肝癌细胞系P53表达后对细胞增殖及P21蛋白表达的影响。方法设计合成P53基因的短发夹RNA(shRNA),并构建pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA重组质粒。重组质粒转染SMMC-7721细胞,经G418抗性筛选获得阳性克隆。克隆形成实验观察细胞的增殖,RT-PCR法及Western blot法分别检测P53、P21的mRNA及蛋白表达。BALB/c裸鼠皮下注射SMMC-7721细胞,建立移植瘤模型,瘤部位多点注射pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA,观察瘤体积变化和瘤重。结果 P1、P2、P3 3条P53 shRNA均可明显降低P53mRNA水平(P<0.05,P<0.05,P<0.01);干扰P53表达明显升高SMMC-7721细胞克隆形成率(P<0.05),P21mRNA和蛋白的表达均随着P53的沉默而显著降低(P<0.05)。P53 shRNA明显增加裸鼠移植瘤的体积和重量(P<0.05)。结论 shRNA干扰P53基因可抑制P53和P21蛋白表达,使癌细胞恶性增殖。

• 单位
  广西中医学院; 广西医科大学