苯丙芘联合佛波酯恶性转化HIOEC细胞的实验研究

作者:潘红芽; 张志愿; 周晓健; 李江; 张萍; 陈万涛
来源:上海口腔医学, 2006, 15(02): 152-156.
DOI:10.3969/j.issn.1006-7248.2006.02.012

摘要

目的:诱导永生化口腔上皮细胞系HIOEC细胞恶性转化,建立HIOEC-B(a)P-TPA细胞系。方法:通过递增浓度的化学致癌剂苯丙芘复合促癌剂佛波酯体外诱导HIOEC细胞,筛选得到具有恶性表型的鳞状细胞癌细胞系HIOEC-B(a)P-TPA。通过微分干涉显微镜和HE染色观察细胞形态学改变,免疫组化染色检测细胞角蛋白和波形蛋白表达情况;软琼脂集落形成、裸小鼠异体皮下成瘤性鉴定HIOEC-B(a)P-TPA细胞的恶性表型。结果:(1)HIOEC细胞诱导培养6个月后,可以在正常生理钙离子浓度、含胎牛血清培养液中生长;(2)细胞在诱导过程中形态多变,最后以成纤维样细胞为主,异形性明显;(3)HIOEC-B(a)P-TPA细胞中细胞角蛋白表达减弱,同时表达波形蛋白;(4)有很强的软琼脂集落形成能力,集落形成率为24.5%;(5)HIOEC-B(a)P-TPA细胞尚未观察到成瘤性。结论:生物化学致癌因素B(a)P和TPA可诱导HIOEC细胞恶性转化,反映了口腔黏膜上皮细胞体外恶变发生、发展过程。

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