一种改良型检测群体感应信号分子的TLC方法

作者：王艳; 张士春; 周进^*

来源：生物学杂志, 2020, 37(01): 97-100.

DOI：10.3969/j.issn.2095-1736.2020.01.097

• 群体感应信号
• 酰基-高丝氨酸内酯
• 薄层色谱
• 制胶板
• 高分辨率

微生物群体感应信号主要包括三类(AI-1,AI-2和AI-3),其中以AI-1(即N-酰基高丝氨酸内酯,Acyl-homoserine lactones,AHLs)的研究最为广泛。以往针对AHLs的检测主要是传统的薄层色谱法(Thin Layer chromatograph,TLC),即采用报告菌株、显色剂X-gal以及半固体培养基三者混合后平铺于TLC板上,通过生物显色反应来进行定性判断。但这一方法在实际操作中存在一些不足,包括显色不均匀、蓝色斑点发散、以及分辨率不高等问题,因此该方法还具有很大的改进空间。利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) A136 (pCF218)建立了一种改良型的TLC方法,主要包括设计一套简易型的制胶板、改变铺板程序以及节省X-gal用量等。结果表明,改良后的方法使得显色斑点更聚焦,显色强度和线性迁移率效果更好,检测分辨率更高,更适合混合型样本。同时该方法操作简便、无需专业培训、初学者易上手,增加了方法的普适性和有效性。

• 单位
  深圳职业技术学院; 清华大学深圳研究生院