摘要
以水解度(DH)和多肽得率(TCA-YSP)为指标,筛选碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和复合蛋白酶等,采用超滤、Sephadex-G15、Sephadex-G50和半制备液相色谱等对腰果粗寡肽进行分离纯化。通过分析型液相色谱和红外光谱鉴定腰果寡肽的纯度和结构。结果显示:碱性蛋白酶得到的酶解液DH和TCAYSP为(17.06±1.52)%,(26.28±0.13)%,均明显高于其他蛋白酶的,为最适蛋白酶;经分离纯化得到纯度高的腰果寡肽,其氨基酸序列为Ile-Ile-Ala-Ile-Pro-Ala-GIy-ValAla-His(IIAIPAGVAH);肥大细胞脱颗粒程度测定结果表明,200μg/mL的腰果寡肽具有显著抑制肥大细胞组胺和β-氨基己糖甘氨酶(β-HEX)释放及磷脂酰丝氨酸外翻的作用,显示腰果寡肽具有优异的抗过敏效应。
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