金荞麦提取物通过ROS/MAPK信号通路途径对结直肠癌细胞抗肿瘤作用

作者：许光亚; 周文月; 周森林; 时政

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-10.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230823

• 金荞麦
• 结直肠癌
• 细胞凋亡
• 自噬
• 活性氧
• 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路

目的：探讨金荞麦对人结直肠癌HCT-116细胞增殖、凋亡及自噬的影响，明确其可能的作用机制。方法：采用细胞增殖与活性检测(CCK8)法检测细胞活性，计算半数抑制率(IC50)；设置空白组、金荞麦组(2、4、8 mg·L-1)共四个处理，采用克隆形成实验观察金荞麦对HCT-116细胞增殖的影响；用流式细胞术检测金荞麦对细胞凋亡的影响；蛋白免疫印迹法(Wester blot)检测自噬相关蛋白；Wester blot检测p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化(p)-p38、p-ERK、p-JNK等蛋白的表达；最后，流式细胞仪和荧光显微镜分析活性氧(ROS)的变化，并用活性氧清除剂(NAC)进行验证。结果：与空白组相比，金荞麦组HCT-116细胞活性明显降低(P<0.05，P<0.01)；与空白组相比，金荞麦组HCT-116细胞凋亡率明显升高(P<0.01)，且具有统计学意义；相比于空白组，自噬相关蛋白泛素结合蛋白(p62)表达降低，自噬特异性基因(Beclin1)、自噬微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)表达增强，且具有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。与金荞麦组比较，金荞麦+NAC组细胞凋亡率明显降低(P<0.01)，相关自噬蛋白Beclin1表达显著降低(P<0.01)、LC3B蛋白表达降低(P<0.01)。最后通过Wester blot检测到金荞麦处理后的有丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白ERK、JNK表达降低(P<0.05，P<0.01)，p-ERK、p-JNK表达增强(P<0.05，P<0.01)。结论：金荞麦可抑制HCT-116细胞增殖，诱导细胞凋亡及自噬，作用机制与ROS/MAPK信号通路途径有关。

• 单位
  食品与生物工程学院; 成都大学; 基础医学院