小麦条锈菌效应蛋白Pst-1374的表达纯化及初步结构特征

作者：方涵; 智东明; 赵海斌; 王晓杰; 康振生; 陶虎; 邓汉卿; 王媛媛^*

来源：安徽农业大学学报, 2019, 46(06): 1010-1015.

DOI：10.13610/j.cnki.1672-352x.20200113.007

• 条锈菌
• 效应蛋白
• 表达与纯化
• 本质上非结构蛋白

由条形柄锈菌小麦专化型(Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst)引起的条锈病是小麦上最具破坏性的病害之一。在条锈菌侵染小麦过程中,条锈菌向小麦细胞分泌效应蛋白,改变宿主的防御反应。效应蛋白Pst-1374来源于条锈菌小种PST-78,将Pst-1374基因插入pET-32a载体并在大肠杆菌中表达,使用镍柱亲和层析和高效液相色谱(HPLC)纯化重组效应蛋白Pst-1374,然后通过液质联用质谱(LC-MS)、动态光散射(DLS)、凝胶过滤层析(GFC)和圆二色谱(CD)研究了Pst-1374的结构特征。结果表明,溶液中的Pst-1374大部分为无规则卷曲结构,只有小部分为规则的二级结构;三氟乙醇(TFE)可以稳定Pst-1374的结构,增加α-螺旋的比例。这些结构特点的发现为其他效应蛋白的结构研究提供了思路。

• 单位
  生命科学学院; 西北农林科技大学