TRPA1参与丙泊酚联合布比卡因所致背根神经节细胞损伤

作者：张鹏; 郭雯静; 袁丹; 喻旭娇; 赖露颖; 徐世元; 李凤仙^*

来源：国际麻醉学与复苏杂志, 2023, 44(11): 1133-1138.

DOI：10.3760/cma.j.cn321761-20230511-00915

• 布比卡因
• 丙泊酚
• 瞬时受体电位通道A1
• 背根神经节

目的探讨非选择性阳离子通道瞬时受体电位通道A1(transient receptor potential channel A1, TRPA1)是否参与丙泊酚联合布比卡因所致背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)细胞损伤。方法以C57B6/J背景的野生型(wild type, WT)小鼠与TRPA1敲除(TRPA1-/-)小鼠为研究对象, 分别采集小鼠腰段(L3～L5)DRG进行原代细胞培养, 培养24 h后进行体外细胞实验。取培养24 h的WT小鼠DRG细胞采用随机数字表法分为4组(每组9孔):对照组(未予以药物处理)、丙泊酚组(丙泊酚10 μmol/L)、布比卡因组(布比卡因2 mmol/L)、丙泊酚+布比卡因组(丙泊酚10 μmol/L、布比卡因2 mmol/L), 观察WT小鼠DRG细胞在不同药物处理后的细胞形态变化。取培养24 h的WT小鼠DRG细胞采用随机数字表法分为3组(每组9孔):对照组(未予以药物处理)、丙泊酚+布比卡因组(丙泊酚10 μmol/L、布比卡因2 mmol/L)、HC-030031+丙泊酚+布比卡因组(丙泊酚10 μmol/L、布比卡因2 mmol/L、HC-030031 1 μmol/L), 采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)法检测DRG细胞活力并计算细胞存活率, MitoSOX Red超氧化物指示剂检测线粒体活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平, JC-1法检测线粒体膜电位水平。WT小鼠与TRPA1-/-小鼠DRG细胞根据小鼠基因型分为WT组与TRPA1-/-组(每组9孔), 比较两组DRG细胞在丙泊酚(10 μmol/L)联合布比卡因(2 mmol/L)处理后线粒体ROS水平及其膜电位的变化。结果与对照组、丙泊酚组、布比卡因组比较, 布比卡因+丙泊酚组DRG细胞形态改变, 甚至细胞破坏。与对照组比较, 丙泊酚+布比卡因组细胞存活率降低(P<0.05), ROS水平升高(P<0.05), 线粒体膜电位水平降低(P<0.05);与丙泊酚+布比卡因组比较, HC-030031+丙泊酚+布比卡因组细胞存活率升高(P<0.05), ROS水平降低(P<0.05), 线粒体膜电位水平升高(P<0.05)。与WT组比较, TRPA1-/-组在丙泊酚联合布比卡因处理后, DRG细胞线粒体ROS水平降低(P<0.05), 线粒体膜电位水平增加(P<0.05)。结论 TRPA1参与丙泊酚联合布比卡因所致体外培养DRG细胞损伤, 与线粒体活性氧及膜电位水平有关。

• 单位
  南方医科大学珠江医院; 乐山市人民医院