miR-31-5p通过VPS53介导的自噬对结直肠癌细胞增殖的影响

作者：黎爽; 彭洪^*; 龚磊; 唐军伟; 吴洪; 黄梅

来源：结直肠肛门外科, 2021, 27(05): 453-459.

DOI：10.19668/j.cnki.issn1674-0491.2021.05.009

• 结直肠癌细胞
• miR-31-5p
• VPS53
• Beclin1
• 自噬

目的探讨miR-31-5p通过VPS53介导的自噬对结直肠癌细胞增殖的影响。方法选择人正常结直肠黏膜细胞(FHC及结直肠癌细胞株HT29、HCT116、SW480、LoVo进行研究。采用实时荧光定量PCR实验检测miR-31-5p在前述各种细胞中的表达,miR-31-5p对VPS53 RNA表达的影响,miR-31-5p、VPS53对Beclin1 RNA表达的影响。采用CCK-8法检测细胞活力。利用数据库Targetscan筛选与miR-31-5p靶向结合的靶基因,并通过双荧光素酶报告实验进行验证。利用数据库GEPIA分析VPS53和Beclin1表达的相关性。采用透射电子显微镜实验探究VPS53对细胞自噬的影响。采用蛋白免疫印迹实验(Western blot)分析VPS53对Beclin1蛋白表达的影响。结果与FHC细胞相比,HCT116、LoVo、HT29、SW480细胞的miR-31-5p表达水平均升高(均P<0.05)。过表达miR-31-5p可促进LoVo细胞增殖(P<0.05)。miR-31-5p与VPS53靶向结合。过表达miR-31-5p可下调VPS53的RNA表达水平(P<0.05)。过表达VPS53可抑制LoVo细胞增殖,可逆转过表达miR-31-5p对LoVo细胞增殖的促进作用(均P<0.05)。结直肠癌组织中的VPS53与Beclin1的表达呈正相关。过表达VPS53促进自噬小体的形成。过表达VPS53可上调Beclin1蛋白的表达水平(P<0.05)。自噬抑制剂可逆转过表达VPS53对LoVo细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。过表达miR-31-5p可下调Beclin1的RNA表达水平,过表达VPS53可逆转该现象(均P<0.05)。结论 miR-31-5p是结直肠癌发生发展中的重要调控因子,miR-31-5p在结直肠癌细胞中高表达。miR-31-5p可能通过下调VPS53来抑制Beclin1的表达,通过抑制自噬来促进结直肠癌细胞的增殖。

• 单位
  南充市中心医院