摘要

为了研究大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)对奶牛乳腺成纤维细胞(bovine mammary fibroblast, BMFB)中瘦素(leptin, LP)、长型瘦素受体(leptin receptor, OB-Rb)和Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ, COL Ia1)表达的影响,以探讨大肠杆菌感染引起奶牛乳腺纤维化的分子机制,试验用不同浓度(1×105 cfu/mL、1×106 cfu/mL、1×108 cfu/mL)的热灭活E.coli作用于BMFB,并以无血清培养液作为对照组,同时利用qPCR及Western-blot检测LP、OB-Rb和COL Ia1 mRNA及其蛋白的表达水平并进行相关性分析。结果表明:E.coli作用BMFB后,1×108 cfu/mL处理组LP、OB-Rb和COL Ia1 mRNA的转录水平与对照组相比显著升高(P<0.05),1×108 cfu/mL处理组LP、OB-Rb和COL Ia1蛋白表达水平在24,48小时时显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)且与作用时间呈正相关。LP与OB-Rb mRNA相关性分析显示,两个因子在12小时时显著相关(P<0.05),其蛋白水平相关性分析显示,两个因子在48小时时极显著相关(P<0.01);LP与COL Ia1 mRNA在6小时时显著相关(P<0.05),其蛋白在24,48小时时极显著相关(P<0.01);OB-Rb与COL Ia1 mRNA在24,72小时时极显著相关(P<0.01),其蛋白在6小时时显著相关(P<0.05)。说明1×108 cfu/mL热灭活的E.coli能够促进BMFB中LP、OB-Rb和COL Ia1 mRNA的转录和蛋白表达。