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摘要
目的 观察黄芪多糖对大鼠小肠隐窝上皮IEC-6细胞迁移过程中多胺信号通路Ca2+调节指标的影响，并探讨黄芪促进胃肠黏膜损伤修复的作用机制。方法 采用划痕法建造细胞迁移模型并观察黄芪多糖在无钙培养时对细胞迁移的影响；采用q PCR法检测经典瞬时受体电位通道1(TRPC1)、基质交感分子(STIM)1、STIM2m RNA表达；采用免疫荧光法检测STIM1蛋白的分布及表达；采用蛋白质印迹法检测TRPC1、STIM1和STIM2蛋白表达；采用免疫沉淀法检测STIM1/TRPC1、STIM1/STIM2蛋白复合体的表达。结果 无钙培养(去除胞外Ca2+内流来源)减弱了黄芪多糖促进细胞迁移的作用(P<0.01)。黄芪多糖能提高TRPC1 m RNA和蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)、逆转二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致的TRPC1 m RNA和蛋白表达降低(P<0.01)；黄芪多糖能促进STIM1向胞膜移位并提高其表达水平，改善DFMO所致的STIM1向胞膜移位延迟及表达抑制；黄芪多糖能提高STIM1 m RNA和蛋白表达、逆转DFMO对STIM1 m RNA和蛋白表达的抑制(P<0.05或P<0.01)；黄芪多糖能降低STIM2 m RNA和蛋白表达，逆转DFMO对STIM2 m RNA和蛋白表达的提高(P<0.05或P<0.01)。黄芪多糖能提高STIM1/TRPC1的表达水平，逆转DFMO对STIM1/TRPC1表达的抑制，还可通过提高复合体中STIM1表达水平、降低STIM2表达水平调节STIM1/STIM2表达，并能拮抗DFMO对STIM1/STIM2表达的影响。结论 黄芪多糖促进IEC-6细胞迁移的作用与其影响Ca2+调节蛋白及蛋白复合体表达有关。
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