移植人外周血单个核细胞建立“人-鼠”异种急性移植物抗宿主病模型

作者：李昀桦; 刘楠; 马淑梅; 许文琦; 刘莉^*

来源：世界临床药物, 2020, 41(08): 605-611.

DOI：10.13683/j.wph.2020.08.006

• 移植物抗宿主病
• 异种
• 异基因造血干细胞移植
• 白介素2型受体α
• 动物模型

目的建立人源化小鼠急性移植物抗宿主病模型,并探究可以在早期预测急性移植物抗宿主病进程的细胞因子。方法 24只SPF级M-NSG小鼠分为对照组(n=6)、1组(n=5)、2组(n=4)及3组(n=9)。通过尾静脉向1组、2组及3组小鼠输注不同来源的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),观察小鼠体质量变化、行为学临床表现和死亡率。在造模D8、D15及D22眼眦采血,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆中白介素2型受体α(interleukin-2 receptor α,IL-2Rα)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素(interleukin,IL)-2、IL-6和可溶性生长刺激表达基因2蛋白(growth STimulation expressed gene 2,ST2)表达水平,流式细胞术检测"人-鼠"细胞嵌合率。取肝、肠、肺部病理切片进行苏木精-伊红染色并观察病理变化。结果通过向小鼠尾静脉输注PBMC成功建立异种急性移植物抗宿主病模型,小鼠于D28最早出现体质量减轻、弓背、背毛凌乱、眯眼等急性移植物抗宿主病特征临床表现,于D31出现死亡情况。D60,模型小鼠总死亡率为67.15%。人CD3+ T细胞在小鼠体内嵌合率随淋巴细胞的活化逐渐上升,2组小鼠"人-鼠"细胞嵌合率最高。D8,2组ST2表达水平高于对照组(P<0.05);D15,2组IL-2Rα、TNF-α、IL-6和ST2表达水平高于对照组,且高于D8(P<0.05);D22,2组和3组IL-2Rα及TNF-α表达水平高于对照组,且高于D8(P<0.05)。病理结果提示,急性移植物抗宿主病模型小鼠肝脏出现大面积内皮炎症病灶,肺部出现明显炎症细胞浸润,小肠出现明显绒毛钝化等特征急性移植物抗宿主病靶器官病变情况。结论通过尾静脉向小鼠输注人外周血单个核细胞可建立异种急性移植物抗宿主病模型,通过IL-2Rα表达水平结合人-鼠细胞嵌合率可在早期预测异种急性移植物抗宿主病发病进程。

• 单位
  创新药物与制药工艺国家重点实验室; 中国医药工业研究总院; 上海医药工业研究院