鸡柔嫩艾美尔球虫HAP2基因的克隆与原核表达

作者：梁爽; 王蓓蕾; 项钰; 佟季航; 于鹦月; 马闯; 谭忠亮; 寇叙^*

来源：现代畜牧兽医, 2019, (02): 1-4.

• 柔嫩艾美尔球虫
• HAP2基因
• 原核表达

为研究鸡柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)HAP2(hapless2/generative cell-specific)蛋白的抗原性,根据Gen?Bank发表的HAP2基因的cDNA序列(Gene ID:25252561)ORF设计1对引物,用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫配子体总RNA中扩增HAP2基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接后进行测序和序列分析,将测序正确的HAP2基因亚克隆入原核表达载体pET32a,转化宿主菌E.coli RGB,在IPTG诱导下进行原核表达。结果在20℃诱导12 h条件下成功表达了HAP2融合蛋白大小为41 ku,并应用磁珠纯化的方法纯化了重组蛋白,获得了HAP2融合蛋白,为进一步研究HAP2的抗原性奠定基础。

• 单位
  长春生物制品研究所; 锦州医科大学