飞行时间质谱技术在中国人常见耳聋基因检测中的应用

作者：金孝华; 黄莎莎; 庞珊珊; 戴朴; 高华方; 马旭^*

来源：生殖医学杂志, 2022, 31(10): 1373-1379.

• 非综合征型耳聋
• 基因检测
• 飞行时间质谱

目的 建立基于飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)的中国人群常见耳聋致病基因热点突变高通量检测方法。方法 选取2016年8月至2017年2月于中国人民解放军总医院就诊的700例(327例已知突变位点，373例未进行基因检测)非综合征型耳聋患者作为研究对象，利用327例已知突变位点的非综合征型耳聋样本建立检测耳聋基因(GJB2、SLC26A4和线粒体12S rRNA)30个热点突变位点单一反应MALDI-TOF MS检测方法；利用新建立的单一反应MALDI-TOF MS检测方法对373例未进行基因检测的非综合征型耳聋样本的耳聋致病基因GJB2、SLC26A4和线粒体12S rRNA的30个热点突变进行检测；采取Sanger测序对部分阳性结果样本进行验证。结果 建立了基于MALDI-TOF MS的单一反应检测GJB2、SLC26A4和线粒体12S rRNA的30个突变位点的检测方法，其检测结果与临床基因诊断结果一致，符合率为100%;采用建立的单一反应MALDI-TOF MS检测方法检测373例未知基因突变位点的非综合征型耳聋患者样本发现，56.30%(210/373)的患者携带至少1个突变，其中携带复合或纯合突变可以明确基因诊断的患者为155例，占受检人群的41.55%(155/373),210例阳性突变携带者共涉及55种基因型，其中有5例存在多个基因突变；Sanger测序法检测验证发现，56例阳性结果样本的一代测序结果与MALDI-TOF MS检测结果一致，符合率为100%。结论 基于MALDI-TOF MS建立的单一反应检测耳聋基因GJB2、SLC26A4和线粒体12S rRNA的30个热点突变的方法具有准确、高通量、低成本等特点，有望成为遗传性耳聋病因学检查和预防性筛查的有效手段。

• 单位
  中国人民解放军总医院; 北京协和医学院