体外诱导恒河猴皮肤干细胞分化为结膜上皮细胞的实验研究

作者:卢蓉; 葛坚; 黄冰; 黄丹平; 高楠; 魏雁涛; 王智崇; 彭展
来源:中华医学杂志, 2005, (36): 45-49.
DOI:10.3760/j:issn:0376-2491.2005.36.014

摘要

目的诱导体外培养、纯化的恒河猴皮肤干细胞向结膜上皮细胞分化,探索皮肤干细胞的可塑性。方法体外培养恒河猴皮肤干细胞,用Ⅳ型胶原纯化,纯化前后用流式细胞仪检测β1整合素和角蛋白15阳性细胞比例,纯化后的皮肤干细胞用细胞免疫荧光和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术鉴定β1整合素和角蛋白15。皮肤干细胞转染绿色荧光蛋白基因,24h后挑选出有荧光的细胞,与人结膜上皮细胞共培养10d,再进行结膜上皮细胞的特异性抗原黏蛋白4和角蛋白4的鉴定,检测方法包括细胞免疫荧光和RTPCR。结果体外培养的皮肤干细胞纯化后比例接近90%。细胞免疫荧光和RTPCR检测β1整合素和角蛋白15阳性。转染绿色荧光蛋白基因24h...

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