水稻愈伤组织超低温保存体系的建立

作者：李天菲; 林田; 滕小英; 周丽; 韩静; 刘鸿艳^*; 罗利军^*

来源：植物遗传资源学报, 2021, 22(05): 1219-1227.

DOI：10.13430/j.cnki.jpgr.20210510002

• 水稻
• 愈伤组织
• 超低温保存

水稻种质资源的长期有效保存对于世界粮食安全至关重要,而超低温保存是实现这一目标的最佳方式。本研究以水稻的胚性愈伤组织为材料,利用冻存后恢复培养阶段的新生愈伤率和新生愈伤分化率来评价不同品种不同粒级大小的胚性愈伤组织、不同浓度蔗糖预培养,以及高糖预培养和高糖预培-玻璃化处理2种预处理方式对水稻愈伤组织超低温保存效率的影响,并选用自主开发的15对水稻SSR标记引物,对超低温保存前后的愈伤组织分化的幼苗进行遗传多样性鉴定。研究结果表明,粳稻日本晴和籼稻旱恢3号粒径为1.6～3.0 mm和>3.0 mm的愈伤组织超低温保存后的新生愈伤率都显著高于本品种粒径<1.6 mm的愈伤组织;旱恢3号愈伤组织经100 g/L和170 g/L蔗糖预培养后的新生愈伤率极显著高于240 g/L蔗糖预培养。粳稻WDR48、粳稻日本晴和籼稻旱恢3号仅采用高糖预培处理的新生愈伤率都极显著高于本品种玻璃化处理的新生愈伤率。新生愈伤分化率在处理间与品种间都无显著差异。简单序列长度多态性(SSLP,simple sequence length polymorphism)鉴定表明超低温保存前后的愈伤组织生成的幼苗遗传性稳定。本研究表明利用愈伤组织高糖预培养-直接超低温冻存是一种易操作、高通量、稳定可靠的中长期保存水稻种质资源的方法。

• 单位
  上海市农业生物基因中心