暴马桑黄倍半萜合酶基因SbTps2克隆及其响应茉莉酸甲酯的表达分析

作者：乌木提·巴合提别克; 李亚伟; 佟鑫宇; 朱丽颖; 邹莉^*

来源：中南林业科技大学学报, 2022, 42(10): 158-167.

DOI：10.14067/j.cnki.1673-923x.2022.10.018

• 暴马桑黄
• 倍半萜合酶基因
• 基因克隆
• 启动子克隆
• MeJA
• 诱导表达

【目的】对参与暴马桑黄Sanghuangporus baumii倍半萜合成途径的关键基因SbTps2及其启动子进行克隆和生物信息学分析，并解析不同浓度MeJA对该基因表达的影响。【方法】利用PCR扩增技术克隆暴马桑黄倍半萜合酶基因SbTps2 cDNA全长和启动子序列；用SWISS-MODEL、SignalP-3.0和SOPMA等软件对SbTps2基因和SbTps2启动子序列进行生物信息学分析；以暴马桑黄为试验材料，利用实时荧光定量技术，对不同浓度MeJA诱导下SbTps2基因相对表达量进行了比较分析。【结果】经测序，SbTps2基因全长1 227 bp，编码407个氨基酸，蛋白分子量为45.73 kDa。根据暴马桑黄基因组已知的序列，并结合SbTps2基因cDNA测序结果分析基因的外显子和内含子表明，SbTps2基因包含3个外显子（核苷酸0～527 bp、592～898 bp和953～1 348 bp）和两个内含子（528～591 bp和899～952 bp）;SbTps2蛋白无跨膜结构与信号肽，该蛋白为亲水性不稳定蛋白。系统发育进化树分析结果表明，SbTps2蛋白与已报道的倍半萜合酶基因聚为一支；SbTps2启动子（1 220 bp）生物信息学分析结果表明，它含有典型的启动子元件，如CAAT-box、TATA-box和MeJA等其他反应元件。荧光定量分析结果表明，SbTps2基因转录水平在不同浓度MeJA诱导时有差异性，并且在MeJA诱导浓度为200μM时SbTps2基因转录水平达到最高状态。【结论】通过对SbTps2基因的克隆与表达分析，为后续暴马桑黄倍半萜合酶基因功能的研究奠定了基础。

• 单位
  东北林业大学