草地螟羧肽酶A基因的克隆、表达及序列分析

作者：尹姣; 李克斌; 曹雅忠

来源：昆虫学报, 2009, (02): 216-222.

DOI：10.16380/j.kcxb.2009.02.014

• 草地螟
• c-DNA表达文库
• 羧肽酶A
• 原核表达 Loxostege sticticalis
• cDNA expression library
• carboxypeptidase A
• prokaryotic expression

羧肽酶是昆虫体内重要的消化酶系之一。利用甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)围食膜多克隆抗体免疫筛选草地螟Loxostege sticticalis L.中肠cDNA表达文库,得到编码羧肽酶A的全长cDNA克隆。该cDNA克隆全长1 380 bp(GenBank登录号EU924506),开放阅读框长1 302 bp,编码434个氨基酸,预测分子量和等电点分别为49.1 kDa和9.56。序列含有胰蛋白酶切割位点和催化特征,具有典型的羧肽酶A特性。将该基因与pET30载体重组后,经IPTG诱导,蛋白在大肠杆菌中获得了表达。