摘要

目的通过网络药理学和实验研究探讨小活络丹治疗类风湿关节炎的作用机制。方法从TCMSP及BATMAN-TCM数据库获取小活络丹的有效成分及潜在靶点,以OMIM及GeneCards数据库检索类风湿关节炎靶点基因,用String网站得到蛋白相互作用网络,DAVID数据库进行京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析,获取靶点相应通路;再以Cytoscape3.7.1构建成分-靶点网络及疾病-通路-基因网络。建立RA大鼠模型,以免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠膝关节滑膜成骨细胞转录因子Smad8和肿瘤坏死因子受体TNFR1的蛋白表达;以实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测Smad8mRNA及TNFR1mRNA的表达;HE染色观察大鼠踝关节滑膜病理学变化。结果经整理得出17种有效成分,43个药物-疾病交集靶点,20条涉及炎症,免疫、增殖、凋亡、疼痛等多个与类风湿关节炎相关的信号通路。Smad8蛋白及基因表达模型组明显低于正常组(P<0.05),对照组及高剂量组明显高于模型组(P<0.05);TNFR1蛋白及基因表达模型组显著性高于正常组(P<0.05),高剂量组明显低于模型组(P<0.05);HE染色模型组滑膜增生,成骨细胞较少,排列紊乱,关节腔伴大量炎性渗出物。高剂量滑膜表面较光滑,成骨细胞排列相对整齐。结论通过网络药理学和基础研究初步揭示了小活络丹治疗类风湿关节炎的相关作用机制,促进成骨细胞分化和抑制炎症因子可能是其重要作用机制之一。