口蹄疫病毒OH株结构蛋白基因VP1的克隆与表达

作者：龚真莉; 刘湘涛; 尚佑军; 田宏; 吴锦艳; 尹双辉; 陈国栋

来源：中国兽医科学, 2006, (07): 515-518.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2006.07.001

• 口蹄疫病毒
• VP1基因
• 基因克隆
• 表达 foot-and-mouth disease virus
• VP1 gene
• gene cloning
• expression

采用RT-PCR方法扩增获得了O型口蹄疫病毒的主要免疫原VP1基因,将其插入pMD18-T载体进行序列分析,结果表明,所获得的基因片段含有完整的FMDV结构蛋白VP1编码区。根据表达载体pQE-Trisystem的克隆位点序列和该VPl基因片段的末端序列设计了1对表达引物,以重组pMD-T-VP1阳性质粒为模板,扩增获得了VP1基因,通过酶切将其克隆至表达载体pQE-Trisystem上。经测序证实,重组表达质粒所含的外源基因VP1编码框正确无误。将重组表达质粒pQE-VP1转化至大肠埃希氏菌M15,通过IPTG诱导促使VP1基因高效表达,SDS- PAGE和Western-blot分析表明,...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所