串珠镰孢霉D-泛解酸内酯水解酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

作者：柳志强; 孙志浩

来源：生物工程学报, 2005, (03): 390-395.

DOI：10.13345/j.cjb.2005.03.011

• 串珠镰孢霉菌
• D-泛解酸内酯水解酶基因
• cDNA
• 克隆
• 原核表达 Fusarium moniliforme
• D-lactonohydrolase
• cDNA
• cloning
• Prokaryotic expression

利用D_泛解酸内酯水解酶N末端序列,并根据NCBI中公布的D_泛解酸内酯水解酶cDNA序列设计了一个特异引物,该引物结合Oligo(dT) 1 5,以串珠镰孢霉(Fusariummoniliforme)CGMCC 0 5 36mRNA反转录得到的总cDNA为模板进行扩增,获得约1 5kb左右的片段,将其克隆到T载体上进行测序,对测得的序列进行分析,重新设计了一对引物,并在引物两端分别加上限制酶EcoRⅠ和SalⅠ的识别位点序列,利用热启动PCR成功地扩增出了D_泛解酸内酯水解酶基因,基因片段长度为114 6bp ,该序列同来源于尖镰孢霉菌(F .oxysporum)AKU 370 2菌株的编码...

• 单位
  江南大学; 生物工程学院; 工业生物技术教育部重点实验室