禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡法氏囊细胞Bcl-2和C-myc基因表达及凋亡的影响

作者：顾先哲; 侯宁; 吕晓萍; 高雪丽; 刘超男; 吴文杰; 郑世民^*

来源：中国畜牧兽医, 2022, 49(04): 1488-1496.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.04.031

• 禽网状内皮组织增生病病毒(REV)
• SPF雏鸡
• 法氏囊
• 细胞凋亡

【目的】探究禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus, REV)感染禽类后导致免疫器官发生细胞凋亡的机理。【方法】以1日龄SPF雏鸡为试验对象，将100只SPF雏鸡随机均分为REV感染组和未感染病毒的对照组，REV感染组雏鸡经腹腔感染500μL REV稀释液，对照组雏鸡经相同途径注射等量灭菌生理盐水，于病毒感染后第1、7、14、21、28和42天，2组雏鸡随机各抽取5只，心脏采血处死雏鸡后快速摘取法氏囊。分别应用HE染色和病理切片成像系统测定分析法氏囊细胞核浆比，TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒测定凋亡细胞数，免疫组化法测定Bcl-2和C-myc阳性细胞数量，实时荧光定量PCR和ELISA法分别检测法氏囊Bcl-2和C-myc基因mRNA表达和蛋白含量。【结果】(1)REV感染1日龄SPF雏鸡后21～42 d,其法氏囊淋巴细胞凋亡百分比显著或极显著高于对照组雏鸡(P<0.05;P<0.01);(2)SPF雏鸡感染REV后21和28 d,其法氏囊细胞核浆比显著低于对照组雏鸡(P<0.05);(3)REV感染SPF雏鸡法氏囊中Bcl-2和C-myc阳性细胞数在病毒感染后21和28 d显著高于对照组雏鸡(P<0.05);(4)REV感染SPF雏鸡后21 d,其法氏囊Bcl-2和C-myc基因mRNA表达极显著高于对照组雏鸡(P<0.01)。(5)SPF雏鸡感染REV后，其法氏囊中Bcl-2蛋白含量较对照组雏鸡有不同程度的增加，其中21和28 d分别差异极显著(P<0.01)和显著(P<0.05),病毒感染组雏鸡的C-myc蛋白含量也始终高于对照组雏鸡，且21和28 d极显著增高(P<0.01)。【结论】REV感染所致SPF雏鸡法氏囊细胞Bcl-2和C-myc的mRNA表达以及蛋白含量异常均与病毒感染导致的法氏囊细胞凋亡密切相关，而法氏囊细胞凋亡数量增加与REV感染引发的机体免疫机能抑制密切相关。

• 单位
  东北农业大学