摘要
为了解肝片吸虫(Fasciola hepatica,Fh)组织蛋白酶B9(CatB9)的生物学功能,该研究对Fh CatB9基因进行克隆、表达,并对其免疫原性和在Fh体内的定位进行分析。结果显示:Fh CatB9基因长度为1 038 bp,编码345个氨基酸;编码的蛋白无跨膜区,有信号肽于第19~20氨基酸间。生物信息学分析显示,Fh CatB9蛋白含2个N-糖基化位点、7个磷酸化位点、15个线性B细胞抗原表位和CatB的保守结构域,高级结构显示与大鼠CatB酶原相似。系统进化结果显示,Fh和大片吸虫亲缘关系最近,与其他寄生虫亲缘关系较远。SDS-PAGE和Western blot都在55.3 ku处检出目的条带。免疫组化显示,CatB9在Fh的肠道上皮细胞和排泄管上皮细胞均有表达,重组蛋白的获得为Fh血清学检测试剂的研发提供了一个有潜在价值的候选抗原。
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单位动物科技学院; 石河子大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所