硒代蛋氨酸抑制脂多糖诱导的AML12细胞氧化应激损伤的研究

作者：张小鸿; 陆秋艳^*

来源：中国临床药理学杂志, 2023, 39(14): 2039-2043.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2023.14.014

• 硒代蛋氨酸
• AML12肝细胞
• 氧化应激
• 凋亡
• 脂多糖

目的 研究硒代蛋氨酸(SeMet)对脂多糖诱导的AML12细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。方法 AML12细胞随机分为3组：正常组(不加任何药物刺激)、模型组(加10μg·mL-1脂多糖)和实验组(10μg·mL-1脂多糖+0.1μmol·L-1 SeMet)。每组细胞培养48 h后，以噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力，以烟酸己可碱(Hoechst)染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况，以荧光探针法检测活性氧(ROS)强度，以化学法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSHx)及过氧化氢酶(CAT)水平，以蛋白质印迹(Western blot)法检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、核因子E2相关因子-2(Nrf-2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap-1)及血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白表达水平。结果 正常组、模型组及实验组的细胞活力分别为0.41±0.02、0.32±0.03和0.40±0.02,细胞凋亡率分别为(5.38±0.28)%、(32.67±0.55)%和(9.34±0.66)%,细胞早期凋亡率分别为(2.34±0.25)%、(9.65±0.49)%和(1.17±0.10)%,细胞晚期凋亡率分别为(5.37±0.32)%、(15.42±0.87)%和(9.18±0.16)%,ROS荧光强度分别为15.62±0.46、52.39±2.13和23.64±0.41,MDA含量分别为(5.23±0.27)、(9.41±0.51)和(7.14±0.27)mmol·L-1,SOD活性分别为(132.83±20.54)、(75.32±5.55)和(98.34±4.55)U·L-1,GSHx活性分别为(54.28±2.92)、(34.47±1.67)和(45.06±1.65)mg·L-1,CAT活性分别为(253.61±9.65)、(72.58±2.81)和(196.69±9.49)U·mg-1,Bcl-2蛋白相对表达水平分别0.92±0.03、0.51±0.03和0.95±0.07,Bax蛋白相对表达水平分别为0.41±0.04、1.16±0.07和0.74±0.04,Nrf-2蛋白相对表达水平分别为0.79±0.03,0.16±0.03和0.76±0.03,Keap-1蛋白相对表达水平分别为1.21±0.05、0.56±0.03和1.06±0.08,HO-1蛋白相对表达水平分别1.02±0.03、0.28±0.03和1.01±0.04。正常组、实验组的上述指标与模型组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 SeMet可能通过Nrf-2/HO-1通路减轻脂多糖诱导的AML12肝细胞氧化应激损伤。

• 单位
  福建省疾病预防控制中心