甲型H1N1流感病毒实时荧光PCR诊断试剂盒的制备

作者:李利; 杨秀云; 邹墅; 张雪梅; 李晓波; 李玉香; 吴东林; 李静; 杨文冲; 杜丽娜; 李勇
来源:中国生物制品学杂志, 2010, (07): 751-754.
DOI:10.13200/j.cjb.2010.07.84.lil.021

摘要

目的制备甲型H1N1流感病毒实时荧光PCR诊断试剂盒,并进行验证。方法采用磁珠法从甲型H1N1流感疑似患者咽拭子样品中提取病毒RNA,逆转录合成cDNA。根据NCBI最新公布的大流行甲型H1N1流感病毒(2009)基因序列,设计针对编码基质蛋白M基因的引物和探针,检测甲型流感病毒;设计针对血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因特异性的引物和探针,检测甲型H1N1流感病毒;同时针对人的RNaseP基因设计用于内部控制的引物和探针。所有探针均为Taqman探针,5'端标记FAM,3'端标记BHQ1。对最佳荧光PCR反应条件进行优化,在此基础上组装成甲型H1N1流感病毒实时荧光PCR诊断试剂盒,...

  • 单位
    吉林大学; 长春生物制品研究所; 吉林省疾病预防控制中心

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