脑络欣通和左归丸药物血清体外培养神经干细胞的增殖与分化

作者：陈立铭; 裴磊

来源：中国组织工程研究, 2016, 20(32): 4845-4851.

DOI：10.3969/j.issn.2095-4344.2016.32.020

• 干细胞
• 细胞增殖
• 细胞分化
• 神经干细胞
• 细胞运动
• 分化
• 脑络欣通
• 左归丸
• 药物血清
• 体外培养
• 增殖分化
• 大脑皮层
• 倒置显微镜
• 免疫荧光染色
• 微环境
• 国家自然科学基金

背景:神经干细胞种子来源数量相对有限,增殖分化量相对较少,如何采取有效的措施促进神经干细胞增殖、分化成为研究的焦点。目的:比较脑络欣通和左归丸药物血清对体外培养的大鼠神经干细胞增殖分化的作用。方法:体外分离培养SD大鼠胚胎神经干细胞,加入含10%的脑络欣通以及10%的左归丸药物血清培养基中共同培养。采用倒置显微镜及免疫荧光染色观察脑络欣通和左归丸药物血清对体外培养的大鼠神经干细胞增殖分化的作用,采用倒置显微镜、免疫荧光染色方法进行观察比较。结果与结论:(1)细胞培养24 h后倒置显微镜下观察细胞开始团生长,并聚集成球,但是细胞直径相对较小,48 h后神经球进一步增大,形态相对规则,但是未见神经球分化;(2)左归丸组细胞培养5 d后细胞球突起平均长度,显著大于脑络欣通组(P<0.05);(3)左归丸药物血清培养下大鼠神经干细胞分化为MAP-2阳性细胞率显著低于脑络欣通组(P<0.05),分化为胶质纤维酸性蛋白阳性细胞率显著高于脑络欣通组(P<0.05);(4)将培养48 h的神经球分别放2种入药物血清中培养,12 h后发现神经球贴壁生长,少量细胞迁移。随着时间的延长,迁移的细胞数量开始增多;(5)免疫细胞荧光染色下显示2种药物血清培养下神经元突出均相对较多,且突起的长度较长,神经干细胞神经元以及星形胶质细胞比例差异不显著(P>0.05)。(6)结果提示脑络欣通和左归丸药物血清对体外培养的大鼠神经干细胞增殖分化均具备明显的促进作用,均能营造更加适宜神经细胞增殖等微环境,但是2种药物存在明显的差异,通过脑络欣通和左归丸药物诱导神经细胞增殖分化是可行的。

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 荆州市第一人民医院; 长江大学