HBx基因通过调节凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值促进人肾小管上皮细胞凋亡

作者：何平; 李红; 李德天; 冯国和

来源：中国医科大学学报, 2014, 43(01): 38-44.

• HBx基因
• HK-2
• 凋亡
• 真核表达载体
• 乙肝病毒相关性肾炎

目的探讨HBV x基因(HBx)对人肾小管上皮细胞株(HK-2)增殖和凋亡的影响及机制。方法采用脂质体转染法,将质粒pCDNA3.1(+)HBx转染至HK-2细胞株。细胞实验分5组,对照组、转染空质粒pCDNA3.1(+)组、转染pCDNA3.1(+)HBx24 h组、转染pCDNA3.1(+)HBx 48 h组、转染pCDNA3.1(+)HBx 72 h组。CCK8方法检测HBx对各组细胞增殖抑制率的影响;用透射电镜及AV/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。应用免疫细胞化学及免疫印迹检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2水平。结果经酶切鉴定及测序结果显示pCDNA3.1-HBx构建成功。与对照组相比,空质粒组细胞存活率及凋亡率无明显差异,凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值无明显差异(P>0.05)。转染HBx基因24 h后,细胞增殖明显受抑,凋亡率显著增加,Bax/Bcl-2比值开始增高。至72 h,细胞增殖抑制率最高达到(35.27±1.10)%,细胞凋亡率达到最高为(23.80±2.16)%,Bax/Bcl-2比值显著增高。与对照组及其他各组比较,具有显著性差异(P<0.05)。结论 HBx基因可抑制HK-2细胞增殖并通过提高凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值诱导其凋亡。

• 单位
  中国医科大学附属盛京医院