青鲫sIgZ重链基因的克隆及对嗜水气单胞菌的免疫响应

作者：夏虎; 杨品红^*; 张运生^*; 陈中元; 刘良国; 罗玉双; 肖丕清; 方秀; 孟诗雅; 路典敬

来源：中国水产科学, 2022, 29(10): 1449-1460.

• 免疫球蛋白Z
• 黏膜免疫
• 青鲫
• 嗜水气单包菌

免疫球蛋白是鱼类适应性免疫中主要的效应因子之一,研究鱼类免疫球蛋白对鱼类疾病的免疫防控尤为重要。本研究利用PCR与RACE技术克隆获得青鲫(Carassius auratus indigentiaus)分泌型免疫球蛋白Z(secretory immunoglobulin Z, sIgZ)重链基因cDNA全长序列(基因序列登录号:MZ274344.1),青鲫sIgZ重链基因cDNA序列全长2083 bp,其开放阅读框长1668 bp,编码一条由556个氨基酸组成的肽链,相对分子质量为61.59 kD,理论等电点为7.03。青鲫sIgZ重链基因结构由1个可变区(VH), 4个恒定区(CH1-CH4)以及1个分泌型的尾部(secretory tail,Sectail)构成。在GenBank中进行同源序列检索,青鲫sIgZ氨基酸序列与其他鱼类IgZ的相似性依次为团头鲂(Megalobrama amblycephala)(63.17%)、草鱼(Ctenopharyngodon idella)(60.82%)、鲤(Cyprinus carpio carpio)(52.98%)、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)(37.06%)和金头鲷(Sparus aurata)(35.01%)。利用MEGA 5.1软件进行多重序列比对分析,采用邻接法构建遗传系统进化树,发现青鲫sIgZ基因与同属鲤科(Cyprinidae)鱼类的IgZ聚为一支,青鲫sIgZ与团头鲂的sIgZ亲源关系最近。通过qPCR检测青鲫不同组织中sIgZ基因的表达,发现青鲫头肾中sIgZ基因的表达量最高,中肾、脾和肝脏次之。利用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)对青鲫进行浸泡感染, sIgZ在头肾、脾脏、中肾、肝、肠、鳃和皮肤中的表达水平在感染的28d内先升高后降低,sIgZ的相对表达量在黏膜免疫组织(肠和皮肤)中达到峰值的时间要早于系统免疫组织(头肾和脾脏),肠和皮肤中sIgZ在峰值时的相对表达量显著高于头肾中sIgZ在峰值时的相对表达量,实验结果显示,青鲫sIgZ在肠和皮肤黏膜免疫组织中可能发挥重要的免疫功能。

• 单位
  湖南文理学院