miR-216靶向调控HMGA2对宫颈癌细胞侵袭和迁移的影响

作者：曾康康; 郑蓉; 刘永珍^*; 贺敏

来源：山东医药, 2019, 59(31): 14-18.

• 宫颈癌
• 微小RNA-216
• 高迁移率族蛋白A2
• 细胞侵袭
• 细胞迁移

目的探讨微小RNA-216(miR-216)靶向调控高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对宫颈癌细胞侵袭和迁移的影响。方法采用RT-qPCR法检测人宫颈癌细胞SiHa、HeLa、CaSki和人正常宫颈上皮细胞H8中miR-216表达,选取miR-216表达最低的宫颈癌细胞进行后续实验。将miR-216表达最低的宫颈癌细胞随机分为观察组与对照组,分别转染miR-216 mimics、miR-216 NC。转染24 h,收集细胞,采用RT-qPCR法检测转染效率,采用Transwell迁移实验和Boyden侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,采用Western blotting法检测MMP-2、MMP-9蛋白表达。采用TargetScan软件预测HMGA2 3′UTR与miR-216的结合位点。取上述miR-216表达最低的宫颈癌细胞,随机分为miR-216 mimics+HMGA2 WT组、miR-216 mimics+HMGA2 MUT组、miR-216 NC+HMGA2 WT组、miR-216 NC+HMGA2 MUT组,miR-216 mimics+HMGA2 WT组转染miR-216 mimics和HMGA2 WT,miR-216 mimics+HMGA2 MUT组转染miR-216 mimics和HMGA2 MUT,miR-216 NC+HMGA2 WT组转染miR-216 NC和HMGA2 WT,miR-216 NC+HMGA2 MUT组转染miR-216 NC和HMGA2 MUT。转染24 h,收集细胞,采用双荧光素酶报告基因实验检测荧光素酶活性。结果 HeLa、SiHa、CaSki细胞miR-216相对表达量均明显低于H8细胞(P均<0.05)。在宫颈癌细胞中以HeLa细胞miR-216相对表达量最低,故选择HeLa细胞进行后续实验。观察组miR-216相对表达量明显高于对照组(P<0.05)。Transwell迁移实验和Boyden侵袭实验时,观察组穿膜细胞数均低于对照组(P均<0.05)。观察组MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.05)。TargetScan软件预测结果显示,HMGA2是miR-216的靶基因。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-216 mimics+HMGA2 WT组荧光素酶活性低于miR-216 NC+HMGA2 WT组(P<0.05),而miR-216 mimics+HMGA2 MUT组与miR-216 NC+HMGA2 MUT组荧光素酶活性比较P>0.05。结论 miR-216能够通过靶向调控HMGA2抑制宫颈癌细胞侵袭和迁移。

• 单位
  十堰市太和医院