miR-101-3p通过MAPK信号通路保护心肌缺血再灌注损伤的机制研究

作者：蒋凯; 陈永顺

来源：现代医学, 2022, 50(06): 665-671.

• 微小RNA-101-3p
• 心肌缺血/再灌注小鼠
• 缺氧/复氧心肌细胞
• 丝裂原活化激酶信号通路

目的:观察miRNA(miR)-101-3p对小鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤心脏的作用及缺氧/复氧(H/R)H9C2细胞存活的影响，并探究其作用机制。方法:建立I/R小鼠模型和H/R H9C2细胞模型。miR-NC、miR-101-3p注射入I/R小鼠再进行I/R模型制作；脂质体法将agomiR-NC、agomiR-101-3p转入H9C2细胞再进行H/R模型制作，部分细胞用二甲基亚砜(DMSO)、丝裂原活化激酶(MAPK)信号通路抑制剂SB203580预处理30 min;心脏超声检测小鼠左室舒张末压(LVDP)、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)等指标；细胞计数试剂盒(CCK8)、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素-碘化丙锭(Annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞增殖率、凋亡率；双荧光素酶报告实验检测细胞荧光活性；蛋白质印迹法(WB)检测细胞MAPK1、MAPK6、MAPK8蛋白表达。结果:与对照组小鼠心脏或H9C2组细胞相比，I/R组小鼠和H/R H9C2细胞中miR-101-3p的表达均显著降低，小鼠心脏LVDP、LVEF、LVFS均显著下降，细胞增殖率显著降低，凋亡率显著升高(P<0.05)。过表达miR-101-3p后，小鼠心脏LVDP、LVEF、LVFS均显著上升，细胞增殖率显著升高，凋亡率显著降低(P<0.05);miR-101-3p显著抑制野生型MAPK1、MAPK6、MAPK8细胞的荧光活性，并负向调控其蛋白表达；MAPK信号通路抑制剂加强了miR-101-3p过表达对H/R H9C2细胞的促进增殖和抑制凋亡的作用。结论:miR-101-3p可保护缺血再灌注心肌损伤，促进心肌细胞增殖，抑制凋亡，其机制与直接靶向抑制MAPK信号通路活性有关。

• 单位
  商丘医学高等专科学校