柔嫩艾美耳球虫穿孔素样蛋白基因的原核表达与亚细胞定位

作者：王文青; 蒋保余; 曲自刚; 刘保红; 肖星星; 马雪婷; 许笑; 蔡建平^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(11): 1406-1414.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0175

• 柔嫩艾美耳球虫
• 穿孔素样蛋白
• m RNA水平
• 亚细胞定位

为了研究柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)穿孔素样蛋白(Et PLP)在球虫感染中与宿主相互作用关系,首次成功获得EtPLP1(1 932 bp)和EtPLP2(4 215 bp)2个目的基因。通过表达纯化得到2个大小分别为37和67ku的目的蛋白,Western-blot结果显示其反应原性良好。通过免疫荧光技术,观察到EtPLP1定位在子孢子顶端。m RNA转录水平检测结果显示,EtPLP1在子孢子阶段的表达量最高,其次是第1代裂殖子阶段,EtPLP2m RNA水平在第1代裂殖子阶段表达量最高,其次是第2代裂殖子阶段;它们在其他阶段表达量极低或不表达。结果表明EtPLP1和EtPLP2可能参与虫体入侵与逸出宿主细胞,为EtPLPs蛋白功能研究奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 甘肃农业大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室