慢病毒转染敲低HDAC1表达对胃癌干细胞干性增殖、迁移及侵袭的影响及其机制研究

作者：刘小娟; 刘复娜; 张艳芳; 陈策

来源：疑难病杂志, 2018, 17(07): 715-758.

• HDAC1
• 胃癌干细胞
• 增殖
• 迁移
• 侵袭
• Nanog
• BMi1
• C-Myc

目的通过慢病毒转染敲低胃癌干细胞观察HDAC1表达对人类胃癌干细胞干性增殖、迁移及侵袭的影响以及对胃癌干细胞干性相关基因表达的影响,进一步探讨HDAC1低表达对人类胃癌干细胞增殖分化的影响及机制。方法2017年7—10月于华北石油管理局总医院细胞实验室进行。通过慢病毒转染将细胞株分为实验组对照组。以Nanog为胃癌细胞干性标志物,流式细胞术筛选出胃癌干细胞。通过慢病毒转染技术干扰胃癌干细胞中HDAC1表达,实时定量PCR(qRT-PCR)和Western Blot方法检测干扰效率。采用MTT比色法和划痕试验分别观察2组细胞增殖和迁移能力的差异;通过Transwell实验观察2组细胞侵袭能力的差异;采用qRT-PCR和Western Blot方法检测2组细胞干性相关基因表达。结果(1)实验组胃癌干细胞的增殖能力在96 h、120 h,均显著低于对照组(t=5.471、7.251,P均<0.001)。(2)通过细胞划痕实验观察到实验组胃癌干细胞的24 h划痕愈合速度较对照组慢,HDAC1的低表达降低胃癌干细胞的迁移能力,2组比较差异具有统计学意义[(20.23±5.46)个vs.(39.96±3.48)个,t=6.813,P=0.001]。(3)Transwell实验显示,实验组胃癌干细胞的侵袭能力显著低于对照组,HDAC1低表达降低胃癌干细胞的迁移能力,2组穿膜细胞数差异具有统计学意义[(21.51±4.32)个vs.(62.63±4.21)个,t=15.242,P=0.000]。实验组细胞干性相关基因Nanog、BMil、c-Myc表达均显著低于对照组(0.23±0.06 vs.1.00±0.01,t=28.306,P=0.000;0.64±0.11 vs.1.00±0.01,t=7.288,0.001;0.48±0.09 vs.1.00±0.01=12.841,0.000)。结论HDAC1低表达可降低胃癌干细胞的增殖、迁移及侵袭能力;HDAC1低表达下调BMi1基因表达可能是其降低胃癌干细胞的增殖、迁移及侵袭的机制之一。

• 单位
  华北石油管理局总医院