基于重组E2蛋白的猪瘟病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

作者：孙元; 夏照和; 梁冰冰; 彭伍平; 仇华吉

来源：中国兽医科学, 2008, (04): 315-319.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2008.04.009

• 猪瘟病毒
• E2蛋白
• 密码子优化
• 杆状病毒表达系统
• 间接ELISA classical swine fever virus(CSFV)
• envelope glycoprotein E2
• codon optimization
• baculo-virus expression system
• indirect ELISA

根据昆虫细胞密码子偏嗜性,对猪瘟病毒E2基因进行密码子优化,并利用昆虫杆状病毒表达系统进行了表达,表达水平约为野生型E2基因的3倍。将表达的重组E2蛋白纯化后作为ELISA包被抗原,建立了一种基于重组E2蛋白的间接ELISA方法,并对此方法的反应条件进行了优化。确定的ELISA最佳条件为:抗原包被浓度为2μg/mL,封闭液为10 g/L聚乙烯醇PBS溶液,被检血清1∶160稀释,辣根过氧化物酶标记的兔抗猪IgG(二抗)1∶5 000稀释。确定的阴性血清临界D450 nm值为0.30,阳性血清临界D450 nm值为0.35。将该ELISA方法与IDEXX公司生产的猪瘟病毒抗体检测试剂盒做相关比较...