护卵汤对早发性卵巢功能不全模型小鼠SIRT1/NF-κB/p53/p21通路的影响

作者：邓敦; 吴阳; 申思楠; 刘秀; 雷磊^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2021, 27(15): 36-42.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211408

• 早发性卵巢功能不全(POI)
• 护卵汤
• 沉默信息调节子1(SIRT1)
• 核转录因子-κB(NF-κB)
• p53
• p21

目的:观察护卵汤对雷公藤多苷诱导早发性卵巢功能不全模型小鼠卵巢组织中凋亡相关蛋白沉默信息调节子1(SIRT1),肿瘤抑制基因p53,乙酰化p53(Ac-p53),细胞周期蛋白依赖性抑制剂p21,核转录因子-κB(NF-κB)p65表达情况及组织结构变化。方法:50只雌性C57BL/6J小鼠随机分正常组、模型组、护卵汤低、高剂量组、戊酸雌二醇组,采用雷公藤多苷80 mg·kg-1·d-1连续灌胃,第15天给予护卵汤低、高剂量组1.6,6.2 g·kg-1·d-1灌胃,戊酸雌二醇组给予戊酸雌二醇0.13 mg·kg-1·d-1,连续21 d,正常组予等量蒸馏水。末次给药后取血和卵巢,苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态学变化,ELISA检测血清中抗苗勒激素(AMH),促卵泡激素(FSH),黄体生成素(LH)水平含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)法检测p53,p21 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SIRT1,p53,p21,Ac-p53,NF-κB蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠动情周期紊乱,卵巢体积减小,各级卵泡数明显减少,AMH含量降低,FSH,LH含量升高,p53,p21 mRNA表达显著升高,p53,p21,Ac-p53,NF-κB蛋白表达显著升高,SIRT1蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,护卵汤高剂量组卵泡增多,AMH升高,FSH,LH降低,SIRT1蛋白表达升高(P<0.01),p53,p21 mRNA表达水平显著下调(P<0.01),p53,p21,Ac-p53,NF-κB蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论:护卵汤的治疗可明显扭转衰老进程,其改善卵巢功能的机制可能与提高了卵巢细胞中SIRT1/NF-κB/p53/p21通路活性,改变细胞凋亡状态相关,从而增加了生长卵泡及成熟卵泡含量,降低了闭锁卵泡的含量。

• 单位
  湖南中医药大学; 中国人民解放军第二军医大学