摘要

目的探讨热休克预处理骨髓间充质干细胞(BMSCs)对化疗性卵巢早衰的疗效。方法分离、培养并鉴定大鼠BMSCs,42℃水浴处理BMSCs 1h。将125只Wistar雌性大鼠分为5组:正常对照组、模型组、假手术组、BMSCs组、热休克BMSCs组,每组25只。除正常对照组外,其余4组腹腔注射环磷酰胺建立化疗性卵巢早衰模型,建模结束后第1天,BMSCs组、热休克BMSCs组大鼠每侧卵巢各注射1×106个BMSCs、热休克预处理BMSCs,假手术组注射等体量生理盐水。各组均于移植后第1、15、30、45、60天分批处死5只大鼠,观察各组卵巢结构、卵泡数量、大鼠动情周期、血清雌二醇(E2)和卵泡刺激素(FSH)水平及卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果正常对照组大鼠动情周期无改变;模型组和假手术组大鼠在实验中动情周期持续紊乱;细胞移植后1630d,热休克BMSCs组与BMSCs组开始有大鼠恢复正常动情周期,但两组间差异无统计学意义(P1-15d=1.0,P16-30d=0.358,P31-45d=0.325,P46-60d=0.5)。正常观察组激素水平基本平稳,始终高于其余4组。模型组和假手术组E2水平持续下降,FSH水平持续上升。细胞移植后15d,热休克BMSCs组与BMSCs组大鼠的E2水平开始明显高于模型组与假手术组(P<0.05),而FSH明显低于模型组及假手术组(P<0.05)。移植30d后,热休克BMSCs组E2水平开始明显高于BMSCs组(P<0.05),而FSH水平则明显低于BMSCs组(P<0.05);细胞移植后第1天及第15天,模型组、假手术组、BMSCs组、热休克BMSCs组各级卵泡数均明显少于正常对照组(P<0.05);模型组及假手术组各级卵泡持续减少,而移植后第45、60天,热休克BMSCs组、BMSCs组各级卵泡数均明显多于模型组及假手术组(P<0.05),且热休克BMSCs组各级卵泡数明显多于BMSCs组(P<0.05)。细胞移植后第1天,模型组、假手术组、BMSCs组、热休克BMSCs组的卵巢颗粒细胞凋亡指数明显高于正常对照组(P<0.05),但4组间差异无统计学意义(P>0.05)。细胞移植第15、30、45、60天,BMSCs组和热休克BMSCs组大鼠卵巢颗粒细胞凋亡指数均较细胞移植后第1天明显降低,且明显低于模型组及假手术组(P<0.05),且与BMSCs组相比,热休克BMSCs组颗粒细胞凋亡更少(P<0.05)。结论热休克预处理BMSCs能更为有效地修复化疗损伤的卵巢结构及内分泌功能。