一种新型凋亡素融合蛋白的克隆表达及活性测定

作者：赵健; 肖伟; 范立强; 王富军; 吕稼锋; 袁勤生; 刘建文

来源：食品与药品, 2009, (07): 7-11.

• EC-SOD3-凋亡蛋白
• 克隆表达
• 纯化
• 噻唑蓝法 apoptin-EC-SOD3 fusion protein
• cloning and expression
• purification
• MTT

目的克隆表达EC-SOD3-凋亡素融合蛋白,并检测其生物活性。方法PCR扩增出apoptin序列,与表达载体EC-SOD3-pET-28a连接后在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导,表达产物进行Ni2+-NTA纯化和MTT活性检测。结果表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin经酶切鉴定和序列分析,证明质粒构建正确,转化E.coliBL21(DE3)后,重组蛋白获得表达,Ni2+-NTA纯化后的凋亡素融合蛋白纯度达到85%以上,经噻唑蓝(MTT)法测定具有活性。结论成功构建了表达载体pET-28a-EC-SOD3-apoptin,并在大肠杆菌中表达了EC-SOD3-凋亡素融...

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学