梨树腐烂病菌致病力缺陷突变体的筛选和侧翼序列分析

作者：袁洪波; 侯珲; 周增强; 涂洪涛^*; 王丽^*

来源：果树学报, 2021, 38(11): 1966-1974.

DOI：10.13925/j.cnki.gsxb.20210067

• 梨树腐烂病菌
• 突变体
• 致病力
• 侧翼序列

【目的】从梨树腐烂病菌T-DNA插入突变体库中筛选鉴定致病缺陷突变体,并分离致病相关基因。【方法】利用农杆菌介导方法转化梨树腐烂病菌,获得504个T-DNA插入转化子,对其中250个转化子的致病力进行筛选。利用TAIL-PCR对致病力显著降低的突变体的T-DNA插入位点的侧翼序列进行扩增和分析。【结果】与野生型菌株相比,4个转化子(T8、T12、T43和T75)在梨果实和枝条上致病力显著降低。扩增获得T8、T43和T75的T-DNA插入位点的特异侧翼序列,测序后经Blast比对序列结果显示,转化子T8、T43和T75 T-DNA分别插在含MSF结构域的蛋白基因、Zds1基因和假定的谷氨酸合成酶基因。【结论】构建了农杆菌介导的梨树腐烂病菌T-DNA插入突变体库,从中筛选获得4个致病力缺陷的突变体,并分析了致病力缺陷突变体的T-DNA插入位点的侧翼序列,为下一步梨树腐烂病菌致病基因的克隆和功能研究奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院郑州果树研究所