摘要

目的观察靶向caspase-3基因过表达对LN-18人神经胶质瘤细胞移植瘤生长的影响并探讨其机制。方法化学合成caspase-3基因序列,通过同源重组,获得caspase-3基因过表达慢病毒。设置转染组、对照组和空白组,其中转染组细胞转染caspase-3基因过表达慢病毒,对照组细胞转染含阴性序列基因重组慢病毒,空白组细胞不加病毒上清液,慢病毒转染LN-18人神经胶质瘤细胞72 h后测定病毒转染效率,蛋白质印迹法评估caspase-3蛋白表达。制备裸鼠神经胶质瘤荷瘤模型,细胞接种后每3天测量肿瘤体积,21 d后处死动物,剥离肿瘤组织,比较各组瘤块大小,TUNEL法观察各组肿瘤组织内细胞凋亡情况。结果 caspase-3基因过表达慢病毒能有效感染LN-18人神经胶质瘤细胞,体外细胞转染率达到83.7%,转染72 h后,转染组caspase-3蛋白表达显著增加;转染组LN-18人神经胶质瘤细胞移植裸鼠皮下,肿瘤生长速度明显小于对照组和空白组,至移植后21 d,转染组、对照组和空白组移植瘤体积分别为(0.52±0.17)cm3、(2.61±0.22)cm3和(2.38±0.19)cm3,F=104.241,P=0.021 89;移植后21 d,与对照组和空白组相比,转染组移植瘤细胞凋亡显著增加(P <0.001)。结论 caspase-3基因过表达慢病毒转染LN-18人神经胶质瘤细胞可明显促进caspase-3蛋白合成,抑制LN-18神经胶质瘤细胞体内移植后生长,显著增加肿瘤细胞凋亡,可作为神经胶质瘤治疗新手段。

  • 单位
    无锡市第三人民医院