淫羊藿苷调控mTOR/Akt/CREB通路对高糖诱导的足细胞自噬及凋亡的影响

作者：李明霞; 杨谦; 乔海霞; 王晓玲; 贾丽媛; 胡利梅; 任卫东^*

来源：医药导报, 2023, 1-10.

• 淫羊藿苷
• 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
• 蛋白激酶B
• 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白
• 高糖
• 足细胞
• 自噬
• 凋亡

目的探讨淫羊藿苷对高糖诱导的足细胞自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/蛋白激酶B(Akt)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路的影响。方法将小鼠足细胞MPC5分为5组：正常对照组(5.5mmol·L-1葡萄糖)、高糖组(30mmol·L-1葡萄糖)、淫羊藿苷组(30mmol·L-1葡萄糖+5μmol·L-1淫羊藿苷)、GDC-0349组(30mmol·L-1葡萄糖+50μmol·L-1GDC-0349)、淫羊藿苷+GDC-0349组(30mmol·L-1葡萄糖+5μmol·L-1淫羊藿苷+50μmol·L-1GDC-0349)。培养48h后，噻唑蓝法检测MPC5细胞活力；吖啶橙染色观察MPC5细胞自噬情况；流式细胞术检测MPC5细胞凋亡；蛋白印迹法检测MPC5细胞自噬[微管相关蛋白1轻链3(LC3)II、LC3I、自噬相关蛋白(Beclin-1)]、凋亡[Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)]和mTOR/Akt/CREB通路相关蛋白的表达。结果与正常对照组比较，高糖组MPC5细胞活力、Bcl-2、磷酸化mTOR(p-mTOR)/mTOR、磷酸化Akt(p-Akt)/Akt、磷酸化CREB(p-CREB)/CREB蛋白表达水平显著降低(P＜0.05)，自噬能力增强，自噬体表现出橙色荧光，细胞凋亡率、LC3II/LC3I、Beclin-1、Bax蛋白表达水平显著升高(P＜0.05)；与高糖组比较，淫羊藿苷组MPC5细胞活力、LC3II/LC3I、Beclin-1、Bcl-2、p-mTOR/mTOR、p-Akt/Akt、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著升高，自噬能力进一步增强，自噬体数量增多，自噬体呈现出砖红色荧光(P＜0.05)，细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著降低(P＜0.05)，GDC-0349组MPC5细胞活力、LC3II/LC3I、Beclin-1、Bcl-2、p-mTOR/mTOR、p-Akt/Akt、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著降低，自噬能力减弱，自噬体数量减少，自噬体表现出橙色荧光(P＜0.05)，细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著升高(P＜0.05)；淫羊藿苷+GDC-0349可逆转淫羊藿苷对高糖诱导MPC5细胞的作用效果(P＜0.05)。结论淫羊藿苷通过激活mTOR/Akt/CREB通路促进高糖诱导的足细胞自噬抑制细胞凋亡。

• 单位
  河北北方学院附属第一医院