摘要
目的观察Wnt-1诱导分泌蛋白2(WISP-2)基因敲降与乳腺癌细胞增殖活性的相关性以及WISP-2调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)和p27Kip1在乳腺癌移植瘤形成中的作用。方法MCF-7乳腺癌细胞分为三组:A组为正常培养细胞;B组为WISP-2短发夹RNA(shRNA)质粒转染细胞;C组为空质粒转染细胞。MTT法检测WISP-2基因敲降对MCF-7细胞增殖活性的影响。取45只SPF级健康BALB/c雌性裸鼠,随机均分为D、E和F三组,分别于裸鼠右腋部皮下接种0.2 mL携带WISP-2 shRNA质粒转染、空质粒转染和正常培养的生长密度为每毫升1×106个的MCF-7细胞;14 d后,肿瘤最小直径达到0.5 cm视为移植瘤形成。分别采用荧光定量RT-PCR法和Western blot法检测三组移植瘤中WISP-2、Skp2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平。结果 B组细胞增殖活性高于A组和C组(P<0.05)。D组WISP-2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平低于E组和F组(P<0.05),而Skp2 mRNA和蛋白水平高于E组和F组(P<0.05)。结论 WISP-2基因敲降导致Skp2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平异常,诱导乳腺癌细胞增殖,促进乳腺癌移植瘤形成。
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单位天津中医药大学; 天津中医药大学第一附属医院