鸭大肠杆菌O78血清型强毒株分离鉴定及其高密度发酵新工艺

作者：龚凤平; 马海彬; 罗梦萍; 王贵平; 袁建丰^*

来源：中国兽医学报, 2020, 40(06): 1114-1118.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.06.07

• 鸭大肠杆菌
• O78血清型
• 培养基
• 高密度发酵

依据大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)持家基因PhoA PCR检测,从临床病料中分离鉴定出11株鸭致病性E.coli。经O抗原血清型鉴定以及毒力分析,筛选出1株O78血清型鸭E.coli强毒株EC-KP120427。以此菌株为基础,使用单因素法以及正交法,获得O78血清型鸭E.coli强毒株新型高密度发酵培养基,配方中初糖采用甘油替代葡萄糖,无机盐仅添加磷酸氢二钾,同时补充铁、锰、铝3种微量元素,在普通摇床上37℃培养菌液D600 nm可达到9.0以上。使用赛多利斯5 L发酵罐,对EC-KP120427菌株进行发酵培养试验。使用优化的新型高密度发酵培养基,按1∶10比例接种对数生长期种子菌,菌液D600 nm值为1.0、控制温度37℃、pH 7.0、调节空气通气量1.5～5.0 L/min、转速100～400 r/min、发酵至对数生长期以15 mL·h-1·L-1流速慢速流加50%葡萄糖溶液,培养菌液D600 nm值可高达30.0以上,成功实现了O78血清型鸭E.coli强毒株高密度发酵。本研究为致病性E.coli高密度发酵技术标准的建立奠定基础,同时为水禽E.coli细菌疫苗的改进提供了技术支持。