大肠杆菌表达腺苷蛋氨酸合酶及产酶条件优化

作者：毛职医; 谈新苑; 曹蓉; 张晓娟; 付静; 徐建国; 徐国强^*; 张晓梅; 许正宏

来源：食品与发酵工业, 2020, 46(10): 8-13.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023219

• 大肠杆菌
• S-腺苷蛋氨酸合酶
• 异源表达
• 酶法合成
• 诱导条件优化

腺苷蛋氨酸(adenosymethionine,SAM)是人体中重要的代谢中间体,在医疗上被广泛应用于治疗肝炎,抑郁症以及关节炎等疾病。酶法进行腺苷蛋氨酸的生产具有良好的工业前景。将来源于酿酒酵母BY4741中的腺苷蛋氨酸合酶基因(sam2)进行密码子优化后,与p ET-28a(+)和p ET-3b(+)进行连接获得重组质粒p ET-28a(+)-sam2和p ET-3b(+)-sam2,分别实现其在E. coli BL21(DE3)和E. coli Rosetta(DE3)中的异源表达,结果表明,重组菌E. coli BL21/p ET-28a(+)-sam2的SAM酶活较高,达到0. 184 U/m L。对该重组菌株进行发酵条件优化,在最优条件下,SAM合酶最高酶活为0. 245 U/m L,比优化前提高34%。

• 单位
  无锡福祈制药有限公司; 江南大学; 生物工程学院; 工业生物技术教育部重点实验室