晚期氧化蛋白产物抑制CD4~＋CD25~＋调节性T细胞的增殖

作者：白晓峰; 冯梅; 李凯; 石华; 王元林; 孙兆林; 徐述雄^*

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(01): 123-126.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.01.040

• 晚期氧化蛋白产物
• 调节性T细胞
• 增殖

目的探讨晚期氧化蛋白产物(AOPP)对CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)增殖的影响及机制,为临床上采取措施保持终末期肾病(ESRD)患者体内Tregs数量和功能正常奠定基础。方法从人外周血单个核细胞分离Tregs和CD4+CD25- T细胞(作为效应T细胞,Teff)、诱导树突状细胞(DC)后做如下处理:Tregs按5×104个细胞/孔培养于U型底96孔板,加入经丝裂霉素灭活的负载同种异体抗原的DC 5×104个细胞/孔和IL-2 100 U/ml,依据是否加入AOPP分为3组:对照组(加入血清白蛋白200 μg/ml);AOPP组(加入AOPP 200 μg/ml)、抗氧化组[100 μmol/L还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶抑制剂DPI预处理1 h后再加入200 μg/ml AOPP]。3H-TdR掺入法检测各组Tregs的增殖能力和免疫抑制功能,Western blot检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化信号转导与转录激活因子5(p-STAT5)和p27kip1等表达情况。结果在AOPP存在的情况下,AOPP组Tregs3H-TdR掺入率为(36 213.3±3 385.9)每分钟放射性荧光闪烁计数(cpm),较对照组(65 557.0±3 981.6) cpm低(P=0.001)。抗氧化组Tregs3H-TdR掺入率为(44 827.0±3 694.6) cpm,较AOPP组高(P=0.041),低于对照组(P=0.003)。AOPP组在Tregs∶Teff为1∶1和1/2∶1的情况下,Tregs对Teff的抑制率分别为(27.3±4.0)%和(23.9±3.7)%,与同比例情况下的对照组抑制率[(68.5±7.9)%和(62.9±5.0)%]比较,差异均有统计学意义(P=0.001、0.001)。AOPP组Tregs内p-ERK、p-Akt和p-STAT5的表达较对照组低(P=0.009、0.021、0.036),而p27kip1表达较对照组高(P=0.036)。抗氧化组Tregs内p-ERK、p-Akt和p-STAT5的表达较AOPP组显著性上调(P=0.034、0.030、0.042),但仍低于对照组(P=0.043、0.039、0.007);而p27kip1表达较AOPP组低(P=0.048),但高于对照组(P=0.047)。结论 AOPP可能通过氧化应激抑制Tregs细胞内p-ERK、p-Akt、p-STAT5活化和促进Tregs细胞内p27kip1的表达,进而抑制Tregs增殖。

• 单位
  贵州省人民医院